Tolerogén dendritikus sejtek TD1

háttér

Az immun tolerancia kiváltása vagy helyreállítása fontos cél az 1-es típusú cukorbetegség (T1D) kezelésének fejlesztésében. A T-sejt-függő autoimmun válasz T1D-ben történő szabályozására szolgáló nem specifikus immunterápiák eddig jelentős mellékhatásokat mutattak, és csak ideiglenesen modulálják a betegség lefolyását. A terápiának előnyösen hosszú távon kell hatékonynak lennie a p-sejtekkel szembeni autoimmunitás célzott szabályozása érdekében.

A tolerogén dendritikus sejteket (tolDC), azaz az önantigénekkel szembeni immunológiai toleranciát biztosító sejteket vonzó megközelítésnek tekintik az autoimmun betegségek antigénspecifikus modulációjában és a T1D patogenezisében való beavatkozásban. Kimutatták, hogy a proinsulin természetes parciális C19-A3 peptidje nem vált ki súlyos allergiás reakciókat, de immunválaszt indukál a T1D-ben szenvedő betegeknél, és hogy ezt a peptidet bemutató tolDC indukálhatja a proinzulin-specifikus szabályozó T-sejteket.

Célmeghatározás

A Tatjana Nikolic által vezetett kutatócsoport a hollandiai Leideni Egyetem Orvosi Központjának immunmodulációs és regeneratív sejtterápiás csoportjából megvizsgálta a proinzulin-peptiddel töltött tolDC klinikai alkalmazhatóságát T1D-ben szenvedő betegek biztonságossági és megvalósíthatósági tanulmányában (D-SENSE tanulmány).

módszertan

A prospektív, nyílt, placebo-kontrollos I. fázisú vizsgálatban kilenc, hosszú távú T1D-ben szenvedő beteg három különböző dózist kapott proinsulin peptiddel töltött tolDC-ben (5 × 106, 10 × 106 és 20 × 106 tolDC injekciókonként).

A vizsgálatba való beiratkozás után a résztvevők leukáferézisen estek át (időtartama 173 és 376 perc között volt), hogy elegendő számú leukocitát gyűjtsenek a CD14-pozitív monociták kiválasztásához, valamint az éretlen tolDC előállításához és krioprezerválásához. Az éretlen tolDC-t két nappal az intradermális beadás előtt felolvasztották, majd érlelték és C19-A3 proinsulin-peptiddel töltötték be. A tolDC termékeknek meg kellett felelniük az összes előírt és érvényesített jóváhagyási kritériumnak.

A sejtpreparátumokat két intradermális injekciós sorozatként (5, 10 vagy 20 intradermális injekció, dóziscsoporttól függően) adtuk be alap- és emlékeztető oltásként, egy hónapos időközönként.

A betegeket szorosan monitorozták a leukephereás után és az utolsó tolDC-injekció után legfeljebb hat hónapig. A fennmaradó β-sejtfunkciót kevert étkezési tolerancia teszt segítségével vizsgáltuk a tolDC injekció előtt és után. Az oltási protokollok megvalósíthatóságát és biztonságosságát értékeltük az injekció-sorozatonkénti három 5 × 106, 10 × 106 és 20 × 106 tolDC dózis esetében.

Eredmények

A tervezett 5, 10 vagy 20 millió tolDC adagot injekciónként nyolc betegnél sikeresen beadták. A legmagasabb dózisú csoportba tartozó betegek esetében csak 19 millió tolDC-t lehetett beszerezni az egyes injekciókhoz tervezett 20 millió helyett.

Minden betegnél a β-sejtek működése és az általános cukorbetegség-kontroll stabil maradt az átfogó megfigyelés hat hónapja alatt. A tolDC-vel végzett kezelést követően a HbA1c értékek, az inzulinigény és az enyhén hipoglikémiás események száma nagyjából változatlan maradt a vizsgálat megkezdése előtti helyzethez képest, az utolsó utólátogatásig. Ez a megállapítás független volt a beadott tolDC dózistól.

A vizsgálatba bevont kilenc beteg közül háromban kimutatható volt a stimulált C-peptid, amely a tolDC-kezelés után nem változott. A fennmaradó β-sejtek ilyen alacsony arányára a biztonságorientált stratégia miatt számítottunk. Csak az 1. típusú cukorbetegségben szenvedő betegek (átlagosan több mint tizenkét évig tartó betegségben szenvedők) voltak jogosultak erre az első humán vizsgálatra.

A tipikus és reverzibilis leukaferezissel kapcsolatos tünetek mellett a tolDC beadása a bőr enyhe szúró és nem viszkető bőrpírját (erythema) okozta az injekció beadásának helyén. A bőrpír az injekció beadását követő első órában nagymértékben csökkent és 24 órán belül eltűnt, így egy kis, 1-3 mm átmérőjű hólyagszerű injekciós heg maradt. A bőrreakciók a tolDC dózisától függetlenül összehasonlíthatók voltak, és két héten belül teljesen eltűntek orvosi beavatkozás nélkül.

Összesen 13 nemkívánatos eseményt regisztráltak 7 betegnél. Három 2. fokozatú esemény volt az allergiás nátha, megfázás és fogfájás, amelyeket nem tartottak összefüggésben a tolDC injekciójával. Összesen tíz 1. fokú eseményt figyeltek meg, köztük két olyan beteg fáradtságát, akik a legalacsonyabb tolDC-dózist kapták. A középső dózisú csoportban két beteg csökkent fehérvérsejtszámot és enyhe eozinofíliát mutatott. A legmagasabb dózisú csoport egyik betegnél száraz bőrt és ízületi fájdalmat találtak. A betegek a megfigyelési perióduson belül minden jelentett eseményből felépültek anélkül, hogy orvosi beavatkozásra lett volna szükség.

Következtetés

Alacsony fokú, elfogadható toxicitást figyeltek meg az intradermális primer-boost vakcinázást követően, injekciónként legfeljebb 20 millió tolDC-vel, proinsulin-epitóppal töltve. A kutatók feltételezik, hogy ez valószínűleg nem kapcsolódik a sejtkészítmény beadásához. A kutatók a legfontosabb megfigyelést értékelték, miszerint a maradék C-peptid felszabadulásban szenvedő betegek nem mutatták a szisztémás immunszuppresszió jeleit, nem indukálták az inzulinallergiát, nem zavarták meg az inzulinterápiát és nem gyorsultak a β-sejtek funkciójának elvesztése.

A szerzők véleménye szerint a proinzulin-peptiddel töltött autológ tolDC-k előállítása és intradermális beadása megvalósítható és biztonságos volt, így a következő lépés a T1D friss diagnózisával és konzervált C-peptidtermeléssel rendelkező betegek klinikai tesztjeinek elvégzése lehet. lenni. A cél annak vizsgálata, hogy ez az új immunintervenciós stratégia késleltetheti vagy megállíthatja-e a β-sejtek progresszív elveszítését. A további teszteknek meg kell mutatniuk, hogy a tolDC β sejteket alkalmazó antigénspecifikus immunmoduláció képes-e megvédeni az autoimmun pusztulás ellen, és gyógyító terápiaként szolgál-e a T1D kezelésére.

A tanulmányt anyagilag támogatta az Európai Unió (FP7-NAIMIT, 241447), a Holland Diabetes Kutató Alapítvány és a DON Alapítvány (Expert Center Grant, 2013 · 40 · 1693).